《馬里奧賽車世界》雖然匯聚了眾多角色，但遺憾的是，與《馬里奧賽車8》不同，未來與其他系列進行聯動引入新角色的可能性并不高。盡管像《塞爾達傳說》中的林克以及《動物森友會》的西施惠短期內不太可能加入，但任天堂方面表示他們正致力于讓《馬里奧賽車世界》中登場的馬里奧角色更具吸引力和多樣性。
在接受外媒采訪時，《馬里奧賽車世界》制作人矢吹光祐透露，開發團隊認為在一個以馬里奧為核心構建的開放世界中加入其他任天堂IP的角色并不合適。因此，目前可操作的50個角色全部來自馬里奧系列。從馬里奧、路易吉這些經典角色，到慢慢魚和奶牛庫巴這類由早期作品中轉變而來的賽車手，任天堂更傾向于挖掘馬里奧歷史中的角色潛力，而不是借用其他IP（不像某些刺猬）。
開發團隊也對部分主要角色進行了外觀調整。例如森喜剛這樣的角色因整體美術風格更新而發生了明顯變化，而其他角色則只做了細微改動，使其更貼近最初在馬里奧賽車中的形象。角色服裝色調更加柔和，所駕駛的車輛外形也更為圓潤——這進一步強化了馬里奧系列一貫的趣味性體驗。
除了已經廣受玩家歡迎的奶牛庫巴之外，矢吹光祐也希望新加入的角色能夠贏得粉絲的喜愛。每位《馬里奧賽車世界》中的角色都擁有多套服飾和自定義選項，確保玩家能找到自己喜歡的角色（或者風格）馳騁賽道。即便無法再操控噴墨烏賊，至少還可以騎著一頭奶牛風馳電掣。
